活血通络口服液对凝血和血栓形成的实验研究

摘　要：目的： 观察活血通络口服液对凝血和血栓的影响。方法：采用实验测定方法。观察测定CT、PT、APTT、TT、PLT值及静脉内血栓形成情况。结果：活血通络口服液能明显延长CT、APTT，以及抑制血栓的形成。结论：活血通络口服液有一定改善脑血栓形成病人的高凝状态作用、对脑中风患者具有很好的预防和治疗作用。

关键词：活血通络口服液；凝血系统；血小板数；血栓
    活血通络口服液是一种治疗脑血管意外的药物，为了探讨活血通络口服液在治疗脑中风的过程中，对血液高凝状态、血栓的作用，对实验动物做了相应药效学研究，现报告如下：
1 材料
1.1 药物
    活血通络口服液：为深棕色水溶液，含生药1g/ml，由中国人民解放军66069部队医院提供。（批号：090605）
    华法令：英国产，3mg/片，批号w0932AA。
    川芎嗪：白色粉未，由北京制药工业研究所赠，用时用NS溶解成合适浓度，PH3。
1.2 动物
    实验用18~20g小鼠（昆明种）和200~300g大鼠（Wistar），均由中国药品生物制品检定所实验动物繁育场提供。（实验动物合格证号：小鼠09068号：大鼠09065号）。
1.3 试剂
    凝血活酶试剂：含钙冷冻干燥品，上海荣盛生物试剂厂生产。激活的部分凝血活酶试剂：Sigma产品。
    凝血酶试剂：100NIH单位/瓶，Sigma产品。
1.4 仪器
    Autoo—FI自动凝血仪 (Auto-FLAutomatilCoagukator)美国DADE产品。八项血球计数仪CELL-DYN900型，美国Seguoia-Turner产品。
2 实验方法
2.1 对小鼠凝血系统的影响
2.1.1 对全血凝固时间（CT）的影响
    取昆明系小鼠50只，♀♂各半，随机分成4组，每组10只，分别ig华法令0.25mg/kg、活血通络3.0、6.0g/kg和蒸馏水20ml/kg作为空白对照，每日一次，连续7天，于未次给药后1小时眼眶取血，毛细管法测定CT值。
2.1.2 对凝血酶原时间（PT）的影响
    取昆明系小鼠50只，♀♂各半，随机分成4组，每组10只，分别ig华法令0.25mg/kg、活血通络3.0、6.0g/kg和蒸馏水20ml/kg作为空白对照，每日一次，连续7天，于未次给药后1小时取血1.5ml，加入3.8%枸橼酸钠0.15ml抗凝，2000转/分离心10分钟，取血浆，用自动凝血仪测定PT值。
2.1.3 对激活的部分凝血活酶时间（APTT）的影响
    按以上PT测定的方法分组小鼠，给药和取血制备血浆，用自动凝血仪测APTT值。
2.1.4 对凝血酶时间（TT）的影响
    按以上PT测定的方法分组动物，给药和取血制备血浆，用自动凝血仪测TT值。
2.2 对小鼠血小板数（PLT）的影响
    取昆明系小鼠50只，♀♂各半，随机分成4组，每组20只，分别ig川芎嗪20mg/kg、活血通络3.0、6.0g/kg和蒸馏水作为空白对照，每日一次，连续7天，于未次给药后1小时取血，用八项血球计数仪测定血小板数。
2.3 对大鼠静脉血栓形成的影响
    Wistar大鼠，随机分成4组，每组8只，♀♂各半分别ig华法令0.25mg/kg、活血通络3.0、6.0g/kg和蒸馏水10ml/kg作为空白对照，每日一次，连续7天，于未次给药后1小时，在乙醚麻醉下，行下腔静脉结扎，2小时后观察形成血栓的动物数及计算形式百分率以及血栓的大小，血栓在60℃干燥2小时后称重。
3 实验结果
3.1 对小鼠凝血系统的影响
3.1.1对全血凝固时间（CT）的影响
    Ig活血通络口服液6.0g/kg后，比对照组明显延长。华法令0.25mg/kg也有明显延长全血凝固时间的作用。见表1
3.1.2对凝血酶原时间（PT）的影响
    ig活血通络口服液6.0g/kg后，PT有一定程度的延长，但与对照组比较无统计学意义。由于PT是反映外源性凝血因子的指标。因此活血通络口服液可能对外源性凝血因子无抑制作用。见表1
3.1.3 对激活的部分凝血活酶时间（APTT）的影响
　　APTT主要受内源性凝血因子的影响。结果表明活血通络可抑制内源性凝血因子的激活或加快灭活已活化的凝血因子。见表1
3.1.4 对凝血酶时间（TT）的影响
    活血通络3.0、6.0g/kg对TT无明显影响。见表1
表1：  活血通络口服液对CT、PT、APTT和TT的影响（n=10）

组别	剂量	CT （秒）	PT （秒）	APTT （秒）	TT （秒）
蒸馏水	20ml/kg	65.30±1.95	12.69±1.97	27.26±5.02	13.60±3.68
活血通络	3.0g/kg	72.67±15.61	12.72±1.58	28.81±3.51	13.38±3.11
	6.0g/kg	99.80±27.49**	13.96±2.34	32.65±4.69*	14.17±2.46
华法令	0.25mg/kg	130.60±25.35***	15.66±1.95	36.45±5.84**	18.39±5.45*

    与蒸馏水对照组比，*P<0.05，** P<0.01，*** P<0.001，下同。
3.2 对小鼠血小板数（PLT）的影响
    ig活血通络口服液3.0、6.0g/kg对小鼠的PLT无明显影响，而川芎嗪20mg/kg能明显降低PLT。见表2
表2：        活血通络口服液对PLT数的影响（n＝20）

组别	剂量	PLT（103/mm3）	P值
蒸馏水	20ml/kg	234±91
活血通络	3.0g/kg	249±74	>0.05
	6.0g/kg	243±84	>0.05
川芎嗪	20mg/kg	130.60±25.35***	<0.05

3.3 对大鼠静脉血栓形成的影响
    Ig不同剂量的活血通络口服液后，血栓重量有不同程度的减轻，ig6g/kg后血栓形成率和血栓的重量均明显减少。华法令与空白对照相比有显著降低血栓形成率和血栓的重量。见表3

组别	剂量	血栓重（mg）	血栓形成率（%）	血栓抵制率（%）
蒸馏水	10ml/kg	5.73±2.32	87.50
活血通络	3.0g/kg	4.80±2.31	87.50	16.2
	6.0g/kg	3.26±4.12	62.50	38.2
华法令	0.25mg/kg	0.83±0.50**	50.00	85.5

表3：      活血通络口服液对大鼠静脉血栓形成的影响（n=8）
　　综上所述，活血通络口服液能明显延长CT、APTT以及抑制血栓的形成，说明活血通络能抑制血液凝固，而且能抑制内源性凝血因子的激活或加快灭活已活化的凝血因子，这些作用对于改善脑血栓形成病人的高凝状态是极为有益的。
4 讨论
　　活血通络口服液是在传统的中医理论基础上，结合临床经验与现代制药新技术研制而成的一种复方制剂。方中用水蛭为君，有破瘀血，通血脉。黄芪“善治风”，为补气要药，用其升被胸中大气，令气足以帅血行，助破血清症寓“气行则血行”之意，亦能缓正气；用川芎活血行气，助君药以通脉络，散风止痛，二药共为臣药。当归为生血之主药，与黄芪共用，因气旺血自易生，黄芪得当归之濡润，又不至燥热；丹参凉血祛瘀，因气虚血瘀者，其经络多瘀滞，以其通气活血，化经络之瘀滞，此二药为佐意，既可助主药攻瘀血，又兼祛瘀生新之意[1]。全方合用，攻瘀兼护正气，具有益气、破血、通脉之功。此研究表明能延长小鼠凝血系统的CT、PT、APTT、TT，降低血小板数，抑制血栓形成，抑制血液凝固，另研究其具有抗脑缺血缺氧作用，增加脑血流量，降低血管阻力作用。因此，临床上用于气虚血瘀型的“中风”患者，具有益气活血、化瘀通络作用。对于改善中风患者的半身不遂、口眼歪斜、舌强言蹇、气短乏力、头晕、自汗出、手足肿胀等症状有较好的临床疗效，值得推广应用。
参考文献：
翁维良. 活血化瘀治疗疑难病［M］. 1993年1月. 北京；学苑出版社，25. 30. 62.

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