免疫便潜血试验对临床诊断结直肠疾病的重要意义

　　【摘要】目的：探讨免疫便潜血试验对临床诊断结直肠恶性疾病的重要意义。方法：选择于笔者所在医院进行免疫便潜血试验（IFOBT）及化学便潜血试验（CFOBT）患者共293例，并行大肠镜检查结合病理确诊。结果：IFOBT对结直肠癌、炎症性结直肠病、结直肠息肉及正常结直肠的阳性准确率高于CFBOT，差异均有统计学意义（P0.05）。结论：IFBOT对早期临床诊断结直肠息肉、炎症性结直肠病和结直肠癌明显好于CFBOT，阳性诊断准确率明显较高。

　　【关键词】化学法便潜血试验；免疫法便潜血试验；结直肠疾病

　　中图分类号R446.6文献标识码B文章编号1674-6805（2016）15-0048-02

　　目前，临床普遍采用便潜血试验（FOBT）检查消化道类出血性疾病，主要用于检验出血量细微、肉眼难以观察的极少量出血，是诊断消化道类出血性疾病的常规检查，也是临床筛查结肠、直肠癌症的有效依据和手段[1-4]。临床常采用的便潜血试验主要有免疫法和化学法两种。过去常规上一直应用化学法（CFOBT）检测便潜血，其中，最为普遍的是采用邻甲苯胺法检测，但容易出现假阳性。自从采用了免疫法后，其中血红蛋白单克隆抗体免疫方法与传统的化学方法相比，灵敏性及特异性都有了很大的提高，而且不受相关食物及药物的影响，采用免疫便潜血试验（IFOBT）进行结肠、直肠癌症的检测与筛查能够使结肠、直肠癌的死亡率降低2.9%～14.7%。通过便潜血实验筛查发现的结肠、直肠病变多为DukesA期或DukesB期，这部分患者癌变局限于黏膜组织或病变侵及浆膜等组织，但尚可一并切除，经治疗后预后较好，这是及早发现和治疗可明显降低结肠、直肠癌死亡率的主要原因。

　　1资料与方法

　　1.1一般资料

　　选择连续在笔者所在医院消化内科内镜室进行胃镜及结肠、直肠镜检查的患者293例，其中男181例，女112例，平均年龄（54.2±15.9）岁，入选标准：经病理诊断明确且临床病例资料完整的患者。排除标准：（1）存在牙衄、便血、月经期、柏油便、痔疮等影响便潜血实验检测结果的患者；（2）化学便潜血检验前不愿接受控制饮食的患者；（3）不愿意接受采用外科手术治疗肿瘤的患者；（4）不愿意按照要求提交粪便检测样本的患者；（5）上消化道出血疾病患者。

　　1.2检测方法

　　293例患者均进行免疫便潜法和化学便潜法检查，并进行结、直肠镜检查结合病理确诊。（1）IFBOT光学检测法：采用日本荣研化学株式会制造的台式全自动便血分析仪，设定检测时间为7min，每次分析10个待测样本，波长为650nm，测量范围为60～1000？g/L，检测阈值设定为110？g/L。（2）邻甲苯胺CFOBT检测法：本实验为定性实验，加入试剂3min后不显示颜色为阴性，加入试剂30s后，由浅蓝色逐渐变成蓝色为1个“+”号，加入试剂后初显浅蓝褐色，逐步变成呈明显蓝褐色为2个“+”号，加入试剂后立即变成明显的蓝褐色为3个“+”号，加入试剂后立即变成蓝黑褐色为4个“+”号。1.3统计学处理

　　采用SAS9.0软件对所得数据进行处理，计量资料采用（x±s）表示；计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验，以P0.05），见表1。

　　3讨论

　　结直肠癌是常见的恶性肿瘤疾病，及早发现、及时治疗是提高结直肠癌患者生存时间和生存率的惟一有效途径。早期结直肠癌症患者通过手术治疗后，4年生存率可以提高到92%以上，晚期结直肠癌患者生存率则不足10%，可见早期诊断及治疗结直肠癌的重要性和紧迫性。筛选和普查结直肠癌是早期发现的有效途径，其检查方法上既要考虑特异性、敏感性，又要考虑依从性。目前比较实用、简单和经济的检查方法，首选FOBT。主要有免疫便潜血法和化学便潜血法。

　　免疫便潜血法（IFBOT）是一种利用自动分析仪和乳胶凝聚反应进行的光学检测方法，OC-乳胶试剂（OC-Auto3LatexReagent）是一种含聚苯乙烯乳胶颗粒的被致敏性溶液，其特性是能够与人类的粪便中血红蛋白发生特异性凝聚反应，而不会与人体摄入含有过氧化物酶活性的食物或者动物的血红蛋白发生凝聚反应，检测结果也不会因VitaminC或非甾体抗炎类药物等抗氧化剂而受影响，因此，受检者不需要限制饮食，这也是该方法的优点之一，自动分析仪通过测量光学密度的变化进行分析，首先对一个已知浓度的标准试剂制定标准区间，通过试样标本血红蛋白浓度比例变化，光学密度也随之变化的特点，测量出相对于标准试剂的待测样本中人血红蛋白的含量。

　　化学便潜血法（CFOBT）临床常用邻甲苯胺法，是一种化学检测法，它利用血红蛋白中的含铁血红素部分有催化过氧化物分解的特征，催化试剂中的过氧化氢，分解、释放新生态的氧，通过氧化检测样本中各种色原物质而呈色，通过深浅颜色，反映出血红蛋白的含量，即出血量的多少，可以看出，它不仅对人体自身出血能够检测到，人体摄入的含有血红蛋白等含氧化物酶的食物，也可以检测到，使实验显色，因此，受食物影响比较大，需要控制检测对象饮食，方法准确性相对降低。

　　FOBT可检测混在粪便里面的肉眼难以观察的微量血液，是集体大规模普查结肠、直肠癌较简便易行的筛选方法[5-7]。其他方法，如粪便CEA检查方法灵敏度不高，不能作为普遍筛选的依据；高度可疑者可采用冲洗法、拉网法或内镜擦拭法行脱落细胞学检查，便于发现早期患者；粪便基因检测的阳性率低；结直肠镜检查虽可直观发现病变部位，但因检查过程中痛苦较大，检查前需要控制饮食及结直肠肠道清洁准备，依从性较差。美国癌症学会癌症指南中提出建议将便潜血检查作为中老年人群筛查肠癌的首选方法[8-11]。临床研究表明，FBOT阳性是早期结直肠癌唯一可以相对准确查出的异常现象，因此，粪便中微量血红蛋白的检测结果对诊断结直肠癌症具有十分重要意义。也有研究表明，为提高结直肠癌的早期诊断及发现率，建议对早期结直肠癌的筛查和诊断采用粪便CEA检测以提高其阳性率，如采用联合免疫法检测便潜血则阳性率将进一步提高。对于便潜血阳性的患者，如果通过便脱落细胞学检查找到可疑细胞或癌细胞，基本能够判定患者结直肠肠道有肿瘤性病变，联合应用两种方法可大大提高大肠癌检出准确率。

　　上述研究结果表明，对于结直肠癌早期诊断，IFOBT相对于CFOBT有更高的阳性准确率，差异有统计学意义（P0.05）。而结直肠癌和结直肠炎症性疾病均为出血性疾病，表现特征相似，通过临床分析，考虑到炎症性肠病患者的出血量相对较多，因此，采用CFOBT实验阳性率也相对较高，而IFOBT阳性准确率与结直肠息肉最大长径、数目呈明显正相关，而且随腺瘤绒毛成分递增而增大，提示IFOBT实验可在一定程度上发现具有癌症病变前性质的绒毛成分或含绒毛样的结直肠息肉，进而有望降低肠癌的病死率和发病率[12]。因此，IFOBT对于结直肠息肉、结直肠癌、结直肠炎症性肠病的阳性准确率明显高于CFOBT。

　　研究43例正常结直肠患者中有1例IFOBT阳性，对诊断结直肠出血性疾病的假阳性率为2.3%，由于该方法有较高敏感性，故分析假阳性的原因可能为该例患者小肠出血性疾病的可能，与CFOBT比较，假阳性率明显降低。本研究IFOBT在结直肠息肉与CFOBT比较中有2例假阴性结果，分析原因，可能一是没有按照严格要求采集标本粪便。二是病变部位出血为间歇性。针对这种情况，笔者建议患者严格按照粪表面采样、切勿沾水等采样要求留取标本，并连续2d留标本检查。

　　综上所述，IFOBT是临床诊断和检测消化道类出血性疾病的一项重要常规检查，也是普查和筛选消化道恶性疾病的有效手段。采用IFOBT既可避免CFOBT的假阳性问题，又可筛出血红蛋白被消化和胶体金试纸条由于后带反应而出现的假阴性反应，能够大幅提高对消化道出血的检出率和准确率，可作为筛检消化道出血性疾病理想的检测方法。在筛查结直肠癌时可将联合免疫法与粪便脱落细胞检测相结合，粪便CEA、粪便DNA检测可提高早期大肠癌检测的阳性率。作者：高微，本文来自《中华结直肠疾病电子》杂志