消痤饮提取工艺的研究

【摘要】 目的优选消痤饮的最佳提取工艺。 方法 以消痤饮的提取物得率、总黄酮含量为指标，应用l9(34)正交试验法，筛选消痤饮的最佳提取工艺条件。结果 消痤饮的最佳提取工艺为：浸渍时间为0.5 h，溶媒用量为13倍，煎煮次数为2次，醇沉体积分数为60%。结论 该工艺稳定可行。

【关键词】 消痤饮;提取工艺;正交试验;总黄酮

　abstract:objectiveto obtain the best extraction process of s l9(34)orthogonal experiment was designed to screen the optimal extraction conditions of xiaocuoyin,with the extraction ratio and contents of total flavonoids as s the optimal extraction conditions were as below:immersing for half an hour after adding 13-fold of water,decocting for 2 times and precipitating concentration of 60% sion the optimized process is stable and workable.

　　key words:xiaocuoyin; extraction process; orthogonal design; total flavonoids

　　消痤饮由槐花、枇杷叶、桑白皮、黄芩、黄连、连翘、生地等12味中药组成，是我院的协定处方。该制剂具有清泻肺热、消肿排脓之功效，用于肺经风热型痤疮的治疗,其提取工艺受多种因素的影响，产品质量易出现波动。本研究采用正交试验考察了浸渍时间、溶媒用量、煎煮次数及醇沉体积分数对提取效果的影响，并进行了验证试验，筛选出了消痤饮最佳提取工艺。

　　1仪器与材料

　　fa2004b型电子天平(上海精密科学仪器有限公司);bp-ⅱ型托盘天平(上海光正医疗仪器有限公司);101as-1型不锈钢数显电热恒温鼓风干燥箱(上海浦东荣丰科学仪器有限公司);760mc紫外-可见分光光度计(上海第三分析仪器厂);hhs-11-4b型电热恒温水浴锅(上海医疗器械五厂);芦丁对照品(批号：100080-200707)购自中国药品生物制品检定所;所用中药材均购自昆山医药有限公司，经鉴定符合《中国药典》2010年版一部项下标准。所用试剂均为分析纯。

　　2方法与结果

　　2.1正交试验设计[1-2]依据预试验结果，选用浸渍时间、溶媒用量、煎煮次数及醇沉体积分数为考察因素，以提取物得率、总黄酮含量为指标，选用l9(34)正交试验表，因素水平表见表1。

　　2.2供试品溶液的制备

　　按处方称取各药材适量，精密称定，共9份，按表2所列因素水平加不同体积的水浸渍后煎煮不同次数，提取液过滤后合并，浓缩至适量，加入不同体积分数乙醇，搅拌，静置24 h，滤过，滤液回收乙醇至干，浸膏用与醇沉时同体积分数乙醇定容于50 ml容量瓶中，摇匀，备用。表1因素水平表

　　2.3提取物得率的测定

　　精密量取供试品溶液30 ml，移至事先已干燥至恒重并已称重的蒸发皿中，水浴挥发至干后，在电热恒温鼓风干燥箱中于105 ℃干燥至恒重，称重。减去空蒸发皿质量，即得干膏重，计算其与所用药材的比值即为提取物得率，见表2。

　　2.4总黄酮含量测定

　　2.4.1测定波长的选择精密称取芦丁对照品适量，加60%(体积分数)乙醇使其溶解，制成质量浓度为0.2 mg·ml-1的对照品溶液。精密吸取对照品溶液4 ml于25 ml容量瓶中，加入蒸馏水6 ml，加5%(质量浓度)nano2溶液1 ml，混匀，放置6 min，加10%(质量浓度)al(no3)3溶液1 ml，摇匀，放置6 min，加4%(质量浓度)naoh溶液10 ml，再加蒸馏水至刻度，摇匀，放置15 min。精密移取“2.2”项下供试品溶液1 ml至25 ml容量瓶中，同法显色。采用紫外-可见分光光度法进行全波长扫描，对照品、供试品溶液均在506 nm处有最大吸收，故选择506 nm为测定波长。

　　2.4.2标准曲线的制备[3]分别精密吸取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml于25 ml容量瓶中，按“2.4.1”项下方法显色，于506 nm测定吸光度，以芦丁对照品质量浓度(ρ)为横坐标，吸光度(a)为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为a=9.3773ρ-9.1×103，r=0.999 5，线性范围为7474 ~44.844 μg·ml-1。

　　2.4.3含量测定精密吸取“2.2”项下供试品溶液1 ml，至25 ml容量瓶中，按“2.4.1”项下方法显色，于506 nm测定其吸光度，计算总黄酮的含量，见表2。方差分析见表3、4。表2正交试验结果与直观分析表3提取率方差分析表表4总黄酮含量方差分析表由表2、3可知，对提取物得率而言，因素b、d的影响具有统计学意义，因提取2次后杂质含量少于提取1次后的杂质含量，故选择较优方案为a2b3c2d2。由表2、4可知，对总黄酮含量而言，因素c、d的影响具有统计学意义，结合节能方面考虑，其较优的方案为a1b1c2d2。2个方案中c2、d2是共同选项。而因素b对总黄酮含量的影响无显著性，从提高提取物得率的角度出发应选择b3;因素a对2个测定指标的影响均无意义，故从简化工艺角度考虑选择a1。因此最佳提取工艺为a1b3c2d2，即浸渍时间为0.5 h，溶媒用量为13倍，煎煮次数为2次，醇沉体积分数为60%。

　　2.6验证试验

　　按最佳工艺条件平行提取3份样品，提取物得率分别为20.21%、19.82%、20.40%，rsd为1.47%;总黄酮质量分数分别为5.70、5.84、5.59 mg·g-1，rsd为2.19%。

　　3讨论

　　本试验通过对不同提取条件下消痤饮的提取物得率、总黄酮含量综合进行评定，发现溶媒用量、提取次数、醇沉体积分数是影响提取的关键因素，而浸渍时间影响较小。确定的最佳工艺条件为：浸渍时间为0.5 h，水用量为13倍，煎煮次数为2次，醇沉体积分数为60%。按此条件进行验证试验，结果表明该工艺稳定可行。

　　在实验过程中，发现醇沉时间对提取结果亦有影响，将在今后工作中作进一步探讨。

【参考文献】
　[1] 李维凤，牛晓峰，赵桂兰.胃平冲剂工艺的优选[j].西安医科大学学报，2001，22(5)：482-483.

　　[2] 张春华,严云良.医药数理统计[m].北京:科学出版社,2001:180-214.

　　[3] 陈健姿，李焕丹.妇炎宁合剂中芦丁的含量测定[j].广东药学院学报，2005，21(3)：262.

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