医学检验大专学生脱落细胞学病理诊断水平的方法探讨

临床检验基础是医学检验专业的主干课程，总学时108学时，脱落细胞学检验是本门课程的重点之一。系统地对细胞形态学进行显微镜观察是本章节的重点和难点，通过显微镜观察，了解各种脱落细胞的形态、特征和数量变化；加上临床病理资料和标本理化性质检验的综合分析，是构成脱落细胞学病理诊断的基础。2005年本校作为新疆医科大学成人医学检验大专办学点，首次开办了以维吾尔族学生为主的3年制医学检验大专班。在具体的临床检验基础实验教学中，提高维吾尔族医学检验大专生脱落细胞学病理诊断水平，笔者针对维吾尔族大专生的特点和实际情况，采取了一些特有的方法，进行了以下尝试。

1.突出以提高能力为中心的高职特色

本校招收的首批成人医学检验大专学生均为维吾尔族在职工作人员，三年制。男3名，女6名，共计9名，平均年龄28岁。学生基本情况：汉语预科1年，基础医学知识结构理论水平偏低，汉语水平低，能够听懂主要的理论知识、内容，看懂教材，具有5年以上检验工作的基本技能，但汉语口头表达能力弱。髙职教育是以“提高能力为中心”，而医学检验专业更是以实验操作和技能训练、临床思维等综合素质培养为重点，增强学生工作岗位的适应能力。针对维族学生在职中专层次水平和临床检验工作的实际需要，以突破脱落细胞学病理诊断技能作为实验教学的首要环节，将脱落细胞学检验教学内容重新组合，以提高维族大专学生临床细胞学诊断水平。

2.实际教学方法

脱落细胞学是传统的肿瘤诊断的方法之一。根据实际情况，笔者采取理论与实验1：1共计28学时。在授课安排上分3个阶段进行教学：正常细胞一分筛鉴别；炎性细胞一动态分析；癌细胞识别——冰山浮现。

2.1 联想与形象教学，对正常细胞分筛鉴别  讲述正常上皮细胞形态组织结构知识时，用生鸡蛋、熟鸡蛋、松花蛋进行形态的形象教学。如将生鸡蛋打破平铺于玻璃板上，蛋黄与蛋清的自然形态与涂片、印片中上皮细胞形态的相似性；将熟鸡蛋进行横切、纵切、斜切与正常组织切片中细胞有核、核大、核小、无核的各种状态进行联想，体会正常核浆比问题。使学生明白无论怎样切，无论核的形状如何变，鸡蛋就是鸡蛋，上皮细胞就是上皮细胞。熟鸡蛋是物理加热、蛋白变性形成黄白相间的蛋黄和蛋清，而组织切片使用甲醛固定剂也是使蛋白变性保持细胞核浆的活体状态。巴氏染色和HE染色是根据细胞核、浆蛋白酸碱性不同，与染料发生嗜酸、嗜碱的化学反应而染色，而松花蛋也是利用盐碱物渗透密度不同的蛋清蛋黄蛋白质产生不同的颜色反应。尽管二者之间千差万别，但作为形象的类比使学生通过鸡蛋“细胞”的认识，从而对镜下细胞的平面、横切、纵切、斜切的形态，能用立体构象的思维去分析体会。针对实际现状，首先以巴氏染色技术为基础实验，通过采取自身的分泌物痰、口腔黏膜刮片法等，制作正常状态下的脱落细胞涂片，显微镜观察、绘图，自己去寻找图谱答案。这种方法对增强学生自身对标本的关注具有很好的促进作用。因为来自自身的组织细胞，来源清楚，部位清楚，相应的脱落细胞的形态特征和数量分布情况也清楚，学生的兴趣增加，主动参与式教学开始进行，教师成为一个旁观者、把门人。一切让学生自己干，学生通过自己染色制作标本和显微镜下的综合观察，进行认真思考后，对细胞的类型作出正确判断。通过学习体会，在教师的正确指导下，能够较快地在镜下判断出正常细胞的类型和组织来源，在顿悟中直抓细胞的染色特征、形态特征及核浆比例。在单个细胞识别的基础上，进一步引导学生分析整个细胞图像，并使这种正常图像印在他们的脑海里，形成一个正常细胞图像的参照图，而就自身作为一个健康人，对于自己正常脱落细胞图像就更能够形成深刻印象。利用显微电视放大教学系统进行反复识别，绘图记忆，重点放在口腔、食道、肝、肾、膀胱、乳腺、胃、肠、子宫颈等组织切片、印片、涂片的观察上。教学中将实验的时间尽量多安排一些，学生逐渐能将涂片中的细胞与印片、切片中的细胞一一对应起来，知道生鸡蛋、熟鸡蛋、松花蛋都是鸡蛋的道理。这一阶段，笔者采取只见“正常细胞”之木；勿视“异常细胞、非细胞物质”之林的分筛鉴别方法。同学之间相互交换标本图片，进一步进行镜下观察，了解面临一个另外的正常标本，你对细胞图像的分析判断，了解不同标本图像的细胞尽管分布不同、形态不同、数量差别，但是同一类正常细胞的核心本质是相同的，从而达到对“万变不离其宗”的总体规律的认识。利用显微镜抽査、分组集体讨论回答的方式，使部分识别有困难的学生积极思维，充分讨论，达到分筛鉴别的目地。学生自己动手制作5张不同组织的印片、涂片、巴氏染色、镜检细胞来源。要求用低倍镜全片观察，高倍镜局部观察，反复反馈正常细胞核浆比的信息，从而得出组织来源的正确结论。

2.2 炎性反应动态分析，培养学生综合分析的思维能力  第2阶段是针对炎性反应状态下的白细胞，除了明确5种白细胞形态的识别外，主要进行炎性反应动态分析。如呼吸道炎性反应主要是基底细胞增生，纤毛柱状上皮核肥大、固缩、破裂、多核以及炎性细胞的变性、坏死、渗出，无纤毛柱状上皮、鳞化等。综合动态分析主要解决慢性炎性反应与上皮细胞增生、化生的相关性。白细胞数量变化的分析：如胸、腹水中间皮细胞增生，大量嗜中性多形核白细胞出现是急性炎性反应征象；淋巴细胞大量出现，应首先考虑慢性炎性反应和结核的可能性，其次为淋巴细胞白血病及淋巴肉瘤。而在阴道分泌物中显示的白细胞和杂菌渐多，阴道杆菌减少，可能是排卵后期而并非炎性反应表现。对于单核-巨噬细胞系统，组织细胞、小吞噬细胞、大吞噬细胞、枯否细胞、灰尘细胞、心力衰竭细胞、多核异物巨噬细胞等只是名称不同，而性质相近，应进行反复识别。这一阶段将学生的注意力由正常细胞转移到炎性反应动态分析上，犹如侦察兵对敌区的地形、地貌熟悉后对敌人的火力分布、局部战况以及伪装的虚设火力的实地侦察、通过收集各方面的信息进行分析判断。在实验中直接用临床胸、腹水，痰液，宫颈分泌物等标本进行“准临床”分析，把细胞学申请单的病历描述、检验项目、影像学资料交给学生，使学生体会到这是一个真实的患者而不是一个不需要负责任的存档标本。在压力面前，学生对临床病理资料通过査看书籍、杂志、专著，学习分析病情，对标本取材、制片、染色的重要性有较深刻的理解。镜检中低倍镜全片扫描，高倍镜分筛鉴别，再低倍、高倍反复观察有了深刻的体会，开始养成综合全面分析的思维能力。

2.3 直接采取临床标本，解决学生细胞病理诊断的心理障碍问题  由于这些学生均为医院在职人员，应发动他们去医院采集临床脱落细胞标本和病理报告申请单复印件。这些标本来自于患者，在实验室再进行巴氏染色，对制作好的细胞涂片结合临床脱落细胞报告单上病例资料描述分析；进行标本理化性质检验、大体描述、镜下描述画图，最后写下自己的诊断意见和诊断依据。在这一实验教学环节中，要解决的主要是心理障碍突破问题。许多学生自己看完整个细胞涂片后，在下诊断上不敢、不会。这种心理障碍是许多中专毕业学生在医院的工作性质所决定的，由于长期只是做检验技术操作的工作，结果均由病理医生诊断和检验科主任审核，从而形成了一种必然的依赖关系。而作为高职大专生就应该具备一定的临床细胞学诊断水平，这对于协助检验科主任、病理医生做出正确判断具有重要作用。在这个阶段应强调：当在整个标本采集、处理、制片、染色、镜检的各个环节均符合标准的情况下，实事求是地把看到的一切描述下来。依据细胞图像描述分析应该有自信，相信自己的眼睛，敢于下初步诊断意见。当脑海中记住了整张细胞学图像未发现异常的细胞，又有临床检验学相关知识作为背景，结合临床资料，对多数的临床病例应该敢于写“未发现癌细胞”或“符合某某炎性反应”的初步诊断意见。

2.4 肿瘤细胞识别——冰山浮现  通过第2阶段对正常细胞和炎性反应动态分析的图像印象深刻后，要求学生进行病理大体标本的重新复习，了解良性肿瘤和恶性肿瘤在肉眼观察下有什么不同，临床病理申请单的资料内容有什么不同。收取临床手术后各种有包块、溃疡、结节的肿块标本，自己取材制作印片、涂片，在这个过程中对这些肿块进行大体描述，以期通过大体肿块标本的观察，对良、恶性肿瘤有一个总体趋势的判断能力。

经过上述学习之后，对肿瘤细胞，主要是癌细胞的识别是教学的重中之重。对癌细胞总特征进行逐条分析，直接将具有典型特征的癌细胞用显微电视教学，通过高倍镜和油镜观察进行认真的绘图记忆；然后将视野转入低倍镜观察，让癌细胞像冰山一样浮出水面，从细胞图像中跳出来，然后在低倍镜卞全片扫描，将大小相近的可疑细胞逐个用高倍镜检査，使癌细胞整体的巨大性，主要是核大、畸形、核浆比与正常细胞的反差作比较；将癌细胞与细胞增生之间极性不同、大小不匀的情况作比较，从而使学生对癌细胞核、胞质、细胞群像的总体把握有了一定程度的认识。制作印片、脱落细胞涂片进行染色镜检观察及描述、画图，并且在同一个标本，对切片、印片、脱落细胞涂片在电视显微镜下进行对比观察。了解病理切片图像的组织结构形态的完整性和印片、脱落细胞涂片的散落性，理解它们之间的区别和联系，最终形成同一组织来源的病理切片、印片、脱落细胞涂片总有相同性质的同一类肿瘤细胞，在核浆比、形态上具有癌细胞的共同特征；把大体标本、病理切片和印片、脱落细胞涂片三者之间的关系进行整体分析，了解细胞形态变化的规律，结合病理诊断，了解良、恶性肿瘤细胞的形态特征。

3.维族医学检验学生细胞学病理诊断存在的问题及对策

关于间变、核异质细胞，宁可将其放入“准正常”范畴，而不可将这些似是而非的细胞给学生留下可以报出癌症的错误结论。因为在短暂的教学中，对于不典型增生、炎性核异质、癌前核异质、癌旁核异质这一细胞演变的分析过程不可能完全讲透，特别是人的综合思维能力需要经过长期临床工作经验的积累，才会形成较强的鉴别能力。对査到的典型的癌细胞，需反复强调要有一定数量的癌细胞作为支持诊断的原则；对于可疑癌细胞，必须通过高年资病理医师进行确定才能报出结果的原则。在报告方式上，由于民族学生用汉语描述的实际水平，要求进行3级报告法。有一些民族学生将“未发现癌细胞”的“未”写成“末”；把发现可疑癌细胞的“疑”写成“题、凝”等别字。把发现典型癌细胞的“典”写成“宝、电”等别字。笔者将第1条改为“没有发现癌细胞”，第2条“疑”字要求学生反复抄写，直到正确为止，第3条只写“发现X癌细胞”。

作者：李志军（新禮维吾尔自治区喀什卫生学校医学检验教研室  844000）