古方黄芪散降糖作用的实验研究

作者：陈艳芬，王春怡，李卫民，高英，吴清和，叶雪兰

【摘要】 目的 研究古方黄芪散对血糖的影响。方法 采用链脲佐菌素(stz)诱发的糖尿病和肾上腺素导致的高血糖小鼠模型，观察黄芪散对血糖小鼠模型和糖耐量的影响，并观察黄芪散对正常小鼠血糖和糖耐量的影响。结果 黄芪散中剂量能降低stz糖尿病小鼠的空腹血糖，高、中剂量能改善stz糖尿病小鼠的糖耐量，降低肾上腺素引起的高血糖，黄芪散高、中、低剂量连续给药3周对正常小鼠的血糖和糖耐量无明显影响。结论 黄芪散具有一定的降糖作用，为其临床 治疗 糖尿病及其并发症提供了实验依据。

【关键词】 黄芪散;血糖;小鼠;药理作用

　　abstract:objective to study the effects of huangqisan on blood glucose level in s diabetic mice induced by streptozotocin (stz),hyperglycemia mice caused by adrenalin and normal mice were used to study the effects of huangqisan on blood glucose level and glucose tolerance in pathological or normal s the moderate dose of huangqisan decreased fasted blood glucose,high dose and moderate dose improved glucose tolerance in stzinduced diabetic mice; high and moderate doses also lowered blood glucose in adrenalineinduced hyperglycemia mice; however,huangqisan showed no obvious effects on blood glucose level and glucose tolerance in normal mice after administration for three sion huangqisan had positive hypoglycemic effects in the study,providing experimental basis for the clinical utilization in the treatment of diabetes and its complications.

　　key words:huangqisan; blood glucose; mouse;pharmacological effects

　　 古方黄芪散源自北宋《圣济总录》，全方由葛根、黄芪、桑白皮三味中药组成，据原文记载主治“三消渴疾，肌肤瘦弱，饮水不休，小便不止”。在明代《普济方》的“消渴门-渴利”附论中也转录了本方。 文献 考察和临床研究发现葛根、黄芪、桑白皮三药单用或配伍应用对糖尿病及其并发症均有良好的疗效[1，2]，但关于该方整方的实验研究未见报道。因此，为了考察黄芪散是否具有降血糖作用，以便进一步的深入研究，本研究应用了stz糖尿病小鼠、肾上腺素高血糖小鼠模型，考察黄芪散对血糖和糖耐量的影响。

　 　1 实验材料

　　1.1 药物与试剂

　　黄芪散浸膏由广州中医药大学科技园制备，每1 g相当于生药1.71 g，密度1.22(50 ℃);盐酸罗格列酮，规格：4 mg/片，贵州圣济堂制药有限公司，批号：20070502;优降糖(格列本脲)，规格：4 mg/片，扬子江药业生产，批号07030401。链脲佐菌素，美国sigma公司，临用前由柠檬酸缓冲盐配制，ph值为4.4;肾上腺素注射液，西安京西双鹤药业有限公司，临用前用生理盐水配制;葡萄糖试剂盒，上海科欣生物技术研究所，批号：20071201。

　　1.2 仪器

　　model 680酶标仪，美国biorad公司;tgl16ga低温离心机，上海安亭 科学 仪器厂。

　　1.3 动物

　　昆明种小鼠，雄性，体质量(20±2)g，spf级，合格证号2007a006，由广东省医学实验动物中心提供，正常饲养2 d后供试。饲养条件为恒温(24±2) ℃，相对湿度50%～70%，饲养环境符合学实验动物环境设施要求。

　　1.4 统计方法

　　所有数据均用spss13.0统计软件进行统计，两组间比较采用方差分析(oneway anova)，以p<0.05为差异有显著性。

　 　2 方法和结果

　　2.1 黄芪散对stz糖尿病小鼠血糖和糖耐量的影响[3]

　　昆明种小鼠，取10只作为正常组，其余作为模型组。小鼠禁食12 h 后，模型组腹腔注射stz 160 mg/kg，正常组腹腔注射柠檬酸盐缓冲液，72 h后，小鼠禁食12 h，眼底静脉丛取血，测定空腹血糖，选择空腹血糖≥11.1 mmol/l的小鼠为糖尿病小鼠50只，将动物随机分为5组：模型组，黄芪散高、中、低剂量组，罗格列酮组，每组各10只。各组动物灌胃给药，每天1次，连续15 d，末次给药后，小鼠禁食12 h，检测葡萄糖耐量(ogtt)。ogtt检测方法：分别于小鼠灌胃葡萄糖溶液(1 g/kg)后0 min、30 min、60 min、120 min，眼底静脉丛取血，离心取上清，测定各时间点的血糖值，并 计算 血糖曲线下面积(auc)。

　　auc计算方法：auc(mmol/l·h-1)=(a+b)×0.5÷2+(b+c)×0.5÷2+(c+d)×1÷2(a、b、c、d分别为0、30、60、120 min血糖值)。

　　结果见表1和图1。结果显示，除正常组之外，各组小鼠空腹血糖均大于11.1 mmol/l，且腹腔注射葡萄糖后，所有小鼠血糖均先升高，后逐步下降，呈现葡萄糖吸收代谢的过程，各组与正常组比较，各时间点血糖值差异均具有极显著性(p< 0.01)，表明stz糖尿病小鼠造模成功。其中，罗格列酮组、黄芪散中剂量组与模型组的空腹血糖相比，差异均具有显著性(p<0.01)，提示两药均可以降低糖尿病小鼠的血糖。给糖负荷后30 min和60 min时，黄芪散高、中剂量组、罗格列酮血糖值明显低于模型组(p<0.05或p<0.01);给糖负荷后120 min时，黄芪散各剂量组血糖值与模型组相比，差异均无显著性，而罗格列酮组仍明显低于模型组(p<0.05)。通过计算各组auc，发现罗格列酮组、黄芪散高、中剂量组auc值明显低于模型组(p<0.01)。

　　2.2 黄芪散对肾上腺素性高血糖小鼠血糖的影响[4]

　　昆明种小鼠60只，随机分为6组：正常组、模型组、罗格列酮组及黄芪散高、中、低剂量组，每组10只。各组动物每天灌胃给药1次，连续10 d，正常组及模型组灌胃等体积蒸馏水。小鼠禁食12 h，末次给药后，分别于小鼠腹腔注射肾上腺素(350 μg/kg)后30 min、60 min，眼眶静脉丛取血，离心取上清，测定各时间点血糖值。表1 黄芪散对糖尿病小鼠血糖和糖耐量的影响结果见表2。各组小鼠在注射肾上腺素之前的血糖值无明显差异，而注射肾上腺素30 min后，各组血糖值都有所升高，尤以模型组小鼠明显，与正常组相比差异具有非常显著性(p<0.01)，60 min后血糖值有所下降，模型组与正常组相比差异仍具有极显著性(p<0.01)。与模型组相比，黄芪散高、中剂量组30 min的血糖值明显降低(p<0.05)，黄芪散中剂量组还能降低60 min的血糖值(p<0.05)，提示黄芪散在一定程度上抑制肾上腺素引起的高血糖。表2 黄芪散对肾上腺素性高血糖小鼠血糖的影响与正常组相比：▲▲p<0.01; 与模型组相比：*p<0.05